軟瓊脂克隆實驗

簡要描述：軟瓊脂克隆實驗某些惡性腫瘤細胞，不僅在貼壁狀態下能增殖，在懸浮狀態下也能增殖，其在軟瓊脂中形成克隆能力反映其惡性增殖程度，這種方法可用于細胞分化的基礎研究和臨床腫瘤治療檢驗等方面。

更新時間：2023-06-29
瀏覽次數：1660

產品分類

實驗

染色實驗動物實驗分子實驗病理實驗細胞實驗基因測序蛋白實驗動物模型抗體定制實驗科研實驗檢測實驗查看全部產品

詳細介紹

軟瓊脂克隆實驗原理:
細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞?？寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
由于細胞生物學性狀不同，細胞克隆形成率差別也很大，一般初代培養細胞克隆形成率弱，傳代細胞系強;二倍體細胞克隆形成率弱，轉化細胞系強;正常細胞克隆形成率弱，腫瘤細胞強。并且克隆形成率與接種密度有一定關系，做克隆形成率測定時，接種細胞定要分散成單細胞暴液,直接接種在碟皿中，持續一周,隨時檢查，到細胞形成克隆時終止培養。
軟瓊脂克隆實驗基本步驟:
(1)取對數生長期細胞，用0.25%胰蛋白酶消化并輕輕吹打，使之成為單細胞，作活細胞計數，用含20%胎牛血清的DMEM培養液調整細胞密度至1x106細胞/L。然后根據實驗要求作梯度信數稀釋。
(2)用蒸餾水分別制備出1.2%和0.7%兩個濃度的低溶點瓊脂糖液,高壓滅菌后，維持在40°C中不會凝固。
(3)按1:1比例使1.2%的瓊脂糖和2xDMEM培養基(含有2x抗生素和20%的小牛血清)混合后,取3mL混臺液注入直徑6cm平皿中(10cm平皿加7-10mL)，冷卻凝固，可作底層瓊脂置CO2溫箱中備用。
(4)按1:1比例讓0.7%的瓊脂糖和2 xDMEM培養基在無菌試管中相混以后,再向管中加入0.2mL的細胞懸液，充分混勻，注入鋪有1.2%瓊脂糖底層平皿中，逐形成雙瓊脂層。待上層瓊脂凝固后，置入37C 5%CO2溫箱中培養10-14天。
(5)把平皿放置在倒置顯微鏡下,觀察細胞克隆數。計算形成率。
軟瓊脂培養法常用檢測腫瘤細胞和轉化細胞系。試驗中瓊脂與細胞相混時，瓊脂溫度不直超過40°C。接種細胞的密度每平方厘來不超過35個，一股6cm的平皿接種1000個細胞。正常細胞在懸浮狀態下不能增殖，不適用于軟瓊脂克隆形成試驗。

產品咨詢

留言框

產品：
您的單位：
您的姓名：
聯系電話：
常用郵箱：
省份：
詳細地址：
補充說明：
驗證碼：

請輸入計算結果（填寫阿拉伯數字），如：三加四=7

99热这里只有精品网,99爱视频在线观看免费,91蜜桃一区二区三区,国产麻豆精品视频免费观看,国内精品久久久999,精品人妻久久一区二区三区,激情人妻久久久久久久,久久久这里只有精品29,久久久久久久久久久色

軟瓊脂克隆實驗

留言框

產品：

您的單位：

您的姓名：

聯系電話：

常用郵箱：

省份：

詳細地址：

補充說明：

驗證碼：